4D-Nucleofector System(核转染系统),可用于免疫细胞、神经细胞、干细胞、内皮细胞等比较难转染的原代细胞和各类细胞系。
Lonza Nucleofector细胞核转染技术(原Amaxa Nucleofector),由核转染仪器、试剂盒、根据细胞类型优化的转染方案共同构成,其根据特定细胞设计的电脉冲参数、特殊电转缓冲液,击穿细胞膜和核膜,使包括DNA、RNA等外源物质,不但可以进入细胞质还可直接进入细胞核,大幅提高传统电穿孔的转染效率, Nucleofector面世以来,已成为动物细胞高效转染代表性技术,成功应用于CAR-T、RNAi、CRISPR文库等,推动基因治疗、细胞治疗等相关研究的进步。
4D-Nucleofector核转染系统,采用模块化设计,每个功能模块可单独配置,满足多种通量和细胞数量的要求:
①(必备)C模块(Core unit),又称核心模块,提供电脉冲和转染程序;
②(可选)X模块(X unit),提供2个电转杯位置、1个16孔电转板条位置 ,用于1~16个样品中低通量,2E4~2E7细胞数量的转染;
③(可选)Y模块(Y unit),提供一个24孔电转板位置,用于贴壁细胞不需消化的原位转染;
④(可选)96孔模块(96-well unit),提供1个96孔电转板位置,用于1~96个样品中高通量,1E4~1E6细胞数量转染;
⑤(可选)LV模块(LV unit),提供1个20mL电转盘位置,用于1个样品低通量、1E7~1E9细胞数量转染。
-采用高分子聚合物电极,避免传统铝电极的离子毒害,维持细胞生理状态,提高活率。
-转染后可快速观察实验结果,例如转染GFP后2小时可观察到蛋白。
-无需自己优化条件,拥有超过650种细胞类型的现成程序,可直接使用,全球共享数据库,超过1500条转染数据可供参考。
-可转染包括DNA、mRNA、miRNA、siRNA、RNP、肽、蛋白质在内的多种底物。
-可用于难以转染的原代细胞、干细胞、神经元、细胞系。
-可不用消化细胞,进行贴壁细胞的原位转染。
-灵活的转染规模缩放,可在低、中、高通量中轻松转移,实现2×10^4至1×10^9个细胞数量的轻松扩展。
-已在全球8000多家同行评议的出版物中发表。
4D-Nucleofector核转染系统已广泛应用于通过RNAi、CRISPR-Cas9、CRISPR-Cas12a进行的基因敲除研究、以及iPS诱导多能干细胞、CAR-T的研究中。
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